Con esta fundación se modificó profundamente el esquema de ocupación territorial y la composición demográfica de la población de la provincia de Santa Fe.
El acervo del Museo de la Colonización de Esperanza se compone de objetos, fotografías y documentos que atestiguan el período que se extiende desde 1853 hasta 1930, aproximadamente. El núcleo central de su patrimonio lo conforma la colección de Luis Grenón, donada a la Municipalidad por su hermano, el padre Pedro Grenón. Este es uno de los museos históricos más importantes de Argentina y su patrimonio se fue acrecentando a través del tiempo con el aporte realizado por los descendientes de aquellos colonos. En la actualidad el museo continúa recibiendo donaciones de objetos que atestiguan la historia de la ciudad. Su exposición permanente se distribuye en tres salas que siguen un orden cronológico, una línea de tiempo que permite reconstruir la historia de Esperanza.
Es una institución dependiente de la Secretaría de Cultura y Deportes de la Municipalidad de Esperanza y debe su existencia a la participación de muchas voluntades que durante años realizaron intentos para su creación. Respondiendo a la inquietud del escritor Gastón Gori de que la ciudad contara con un museo, el interventor federal de la provincia de Santa Fe (después gobernador electo), Leandro Meiners, firmó en 1945 un decreto que creó el Museo de la Colonización de la Ciudad de Esperanza, pero esta iniciativa no se concretó. En 1947 la Municipalidad creó el Museo de la Colonización Agraria y de Bellas Artes y Valores Esperancinos y para su organización convocó al fotógrafo Fernando Paillet. Este espacio hubiese funcionado en el Salón Blanco Municipal, pero tampoco llegó a feliz término.
El 8 de septiembre de 1956, la Comisión del Centenario de la Fundación de Esperanza inauguró el Museo de la Colonización en el edificio ocupado por las oficinas de Correo y Telecomunicaciones, pero más tarde debió cerrar sus puertas por problemas edilicios. Finalmente, y con la colaboración de la Comisión Reorganizadora, se reinauguró el 8 de septiembre de 1968 para permanecer abierto definitivamente hasta estos días, en las instalaciones de la antigua Usina Municipal.